キレものキレックス。

いかにDNA抽出を安く簡単にするか！は大事なテーマだと思います。

るまんどが扱っているのは、動物なので、植物ほど「壁」は厚くないのですが、それでもタンパクだとか多糖やらをPCR系に持ち込んでしまうと、増幅を阻害されることはしょっちゅうです。

るまんどの扱っている生き物では、キア源さんは決して万能な抽出方法ではなく、24個体（8×3）を抽出(精製）したのに、バンドは１つ・・・みたいなこともありました(＠_＠;)。

いくら無駄にしたか？
400円かけるサンプル数、+プラスチックごみ処理費用・・・です。


そんな中、先日、実験の師匠から、「キレックス、けっこういいよ！」との伝令が！

さっそく試したところ、たしかにいいっす！
!(^^)!

なんせ、５％のキレックスを入れて、あっためたら(９０℃で１０~１５分）抽出終了！っていう手軽さがいいです。


発売元のHPを見ますと、キレックスそのものは、キレート剤なのでPCRを阻害するタンパクたちが必要とする「金属をキレートしちゃう働きだけを持っている」そうです。

つまり、この方法は粗抽出なので、PCRだけを目的とする場合は有効だけど、きれいなDNAからいろいろやろうとする場合には、エタ沈などの作業が必要になってきます。

サンプルをどろどろにしたいときはProKと組み合わせて使ったり、長期保存の場合は精製してTE(もしくはAE）で保存するなどしてます。

なにせ、さっさとPCRしちゃうときは、そのまま使っちゃえる気軽さがいいで～す。

しかも、安いときたもんだ～♪


注）キア源さんが必ずしも万能でないというのは、るまんどの経験則（ある生物のくせ？）なので、営業妨害とかで訴えたりしないでね。扱う生物によってはかなりいいらしいので。

AEの中身。

キア源さんのAEって、中身はTEだらうなぁ～と思っていたのけど、自信がなかったので調べてみました。

カタカタ～と検索してみると、キ☆ゲンさんは日本で特許を取っているということが分かりました。その申請書類の中には、

AE（10ｍM　Tris-HCl　PH9.0、0.5ｍM EDTA）

って、書かれてありました。おぉぉぉ。ネット社会って、すごい。
!(^^)!


るまんどが愛用している「どーじん」さんのTEは、10×TE（PH8.0）で、中身は0.1M　Tris-HCl and 10ｍM EDTAなので、AEは、EDTAをけちってアルカリよりに調整した試薬と考えてよさそうです。


DNAは基本アルカリ中で安定だと言われていますが、PCR溶液がアルカリだと増幅を阻害する可能性もあるので、添加するテンプレートの量に気をつけないといけないかも。

あ、キア源さんと同じように扱えば問題ないのか。

これで、残ってるAEをTEのアルカリっぽいのとして有効利用できますな。


(-。-)y-゜゜゜